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過濾除菌操作答疑

問:**近要做一些培養基,有一些糖類需要過濾除菌,但不知道怎么操作,還需要什么輔助設備?

答:你只要有濾膜和配套的過濾器就可以了,一般在超凈工作臺上進行。濾膜用0.22微米或0.45微米兩種規格,指的是濾膜的孔徑大小吧。一般0.22就夠了!

答:如果溶液的量比較大,超過500ml,可以采用已滅菌的抽濾瓶,預先墊好0.22um 的濾膜。抽濾瓶滅菌前要檢查封口用紗布或棉花堵牢,使用時,不用在無菌室中進行,只要保證收集瓶無菌狀態就可以。抽濾后,過濾好的溶液在無菌條件下倒進已滅菌的空試劑瓶中。

如果用小量的溶液過濾,無菌室內用一次性注射器和一次性0.22um濾膜(millipore或pall都有賣)就可以。

答:看過濾的量,如果量小,用注射器加濾器、0.22微米濾膜過濾,濾器加上濾膜后蓋緊,稍旋松,飯盒密封100度蒸餾水煮沸30分鐘滅菌,用來承接無菌糖水的瓶需高壓。用時在無菌操作臺上操作,并先旋緊濾器,注意濾器外流下去的哪怕一滴也會造成染菌;過濾應該是費力的,如果感覺很輕松,則濾膜已破。0.45微米的濾膜一般用于兩次過濾的**次,以防止0.22堵塞。注射器,若能高壓更好些。

如果量大,正壓可用蠕動泵接皮管接不銹鋼濾器大張濾膜,這些都是要高壓的。負壓可用抽濾。

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